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琥珀酸脱氢酶(SDH)样本的前处理

2025/6/21 20:33:49发布9次查看
琥珀酸脱氢酶(sdh)样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
1、 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1ml 试剂一和 10ul 试剂三,用冰浴匀浆器
或研钵匀浆。
2、 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
4、 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 α-kgdh(此步可选做)。
5、 在步骤④的沉淀中加入 200ul 试剂二和 2ul 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或
200w,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次),用于线粒体 α-kgdh 活性测定。
测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 340nm,蒸馏水调零。
2、 样本测定
(1)在试剂五中加入 18ml 试剂四充分溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)
水浴 10min;现配现用;
(2)在试剂六中加入 1ml 蒸馏水,充分溶解待用;现配现用;
(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μl 样本、10μl 试剂六和 180μl 试剂五,混
匀,立即记录 340nm 处 20s 时的吸光值 a1 和 2min20s 后的吸光值 a2,计算 δa=a2-a1。
嗜酸性粒细胞过氧化物酶抗体
核酸内切酶g抗体
酪氨酸蛋白激酶受体a10抗体
胞吐囊复合体蛋白2抗体
磷酸化4e结合蛋白1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
泛素交联酶抗体
eb病毒核抗原抗体-3b抗体
磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体
乙酰基转移酶eid1抗体
微管相关蛋白eb家族3抗体
真核翻译起始因子5抗体
遗传性前列腺癌蛋白2抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体
上皮细胞微管相关蛋白7抗体
碱性鞘磷脂酶7抗体
表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体
长链脂肪酸延长酶长elovl6抗体
酪氨酸蛋白激酶受体a6抗体
酪氨酸蛋白激酶受体a3抗体
酪氨酸蛋白激酶受体a7抗体
酪氨酸蛋白激酶受体b1抗体
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体b1抗体
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